Первое ПГТ-А с использованием человеческих бластоцит, полученных IN VIVO и извлеченных путем промывания матки : сравнение с соответствующими контрольными эмбрионами ЭКО
26.02.2020
Поделиться
Цель исследования
Выяснить, возможно ли после контролируемой стимуляции яичников (COS) и внутриматочной инсеминации (IUI) получить путем промывания матки зачатые in vivo и созревшие человеческие бластоцисты для проведения преимплантационного генетического тестирования на анеуплоидию (PGT-A) и сравнить их морфологические показатели по результатам PGT-A и шкале Гарднера с парными бластоцистами из контрольных циклов ЭКО.
Краткое резюме
В последовательной серии из 134 циклов COS с использованием стимуляции гонадотропинами и последующей IUI промывание матки позволило получить 136 эмбрионов в 42% (56/134) циклов исследования с сопоставимыми показателями эуплоидии in vivo и in vitro, но лучшей морфологией у эмбрионов in vivo.
Что уже известно
Эмбрионы, развивавшиеся in vivo, изученные на животных моделях, обладают другими характеристиками по сравнению с эмбрионами аналогичных видов, полученными in vitro. Такие сравнительные исследования между человеческими эмбрионами in vivo и in vitro не проводились из-за отсутствия надежного метода получения человеческих эмбрионов.
Дизайн исследования
Мы провели одномоментное проспективное контролируемое исследование среди женщин (n = 81), чтобы оценить безопасность, эффективность и осуществимость нового катетера для промывания матки и устройства для извлечения жидкости. Все процедуры промывания проводились в частном учреждении с отделением ВРТ с августа 2017 года по июнь 2018 года. С целью мониторинга клинических исходов и отдаленных осложнений за пациентами наблюдали в течение 30 дней после промывания. У 20 пациенток был проведен один цикл ЭКО (контрольная группа) с тем же протоколом стимуляции яичников для сравнения бластоцист in vivo и in vitro.
Материалы и методы
Для COS женщин стимулировали гонадотропинами. Триггер овуляции был назначен, когда было по крайней мере два доминантных фолликула ≥18 мм, а затем осуществлялась IUI спермой. Промывание матки происходило через 4-6 дней после IUI. Подгруппа из 20 женщин прошла процедуру промывания с последующим циклом ЭКО (контрольная группа ЭКО). Извлеченные эмбрионы характеризовали морфологически, подвергали биопсии трофэктодермы (Тэ), витрифицировали и хранили в жидком азоте. Биопсии анализировались с использованием метода секвенирования следующего поколения (NGS). После промывания назначали инъекции антагониста ГнРГ, чтобы вызвать менструацию.
Результаты
Всего было проведено 134 цикла промывания у 81 женщины. При промывании матки было извлечено 136 эмбрионов за 56 (42%) циклов. На момент криоконсервации было 40 (30%) дробящихся эмбрионов и 96 (70%) бластоцист. Бластоцисты были хорошего качества, причем 74% (70/95) были класса 3BB или выше по классификации Гарднера. Вымытые из матки бластоцисты имели достоверно более высокие морфологические показатели, чем контрольные эмбрионы из группы ЭКО, определяемые методом анализа Хи-квадрат (Р < 0,05). Это первое исследование по вымыванию полученных in vivo человеческих бластоцист после стимуляции яичников для генетической характеристики эмбриона. Восстановленные бластоцисты имели показатели хромосомной эуплоидии, аналогичные показателям, обнаруженным у контрольных эмбрионов из группы ЭКО. В 11 циклах (8,2%) определяемые уровни ХГЧ присутствовали через 13 дней после IUI, которые регрессировали спонтанно в двух случаях и снижались после кюретажа эндометрия в двух случаях. Прогрессирующие уровни ХГЧ были прерваны приемом метотрексата в трех случаях, а четыре пациента получили как кюретаж, так и метотрексат.
Ограничения
Первая цель состояла в том, чтобы оценить целесообразность промывания матки после стимуляции яичников для извлечения бластоцист на анализ, и эта цель была достигнута. Однако система промывания матки не была полностью оптимизирована в предыдущем опыте до уровней, которые были достигнуты в конце клинического исследования и могут быть применимы в клинической практике. Частота хромосомных аномалий у контрольных эмбрионов in vivo и ЭКО была сходной, но это было небольшое исследование. Однако по сравнению с большими историческими наборами данных эмбрионов in vitro генетические результаты in vivo находятся в пределах диапазона высококачественных эмбрионов in vitro.
Последствия интерпретации результатов
Промывание матки предлагает нехирургическую, малоинвазивную тактику для получения эмбрионов фертильных женщин, которые не хотят или не нуждаются в ЭКО, но заинтересованы в проведении ПГТ, сохранении фертильности путем криоконсервации эмбрионов или взаимном ЭКО (в случае лесбийских пар). С научной и потенциальной клинической точки зрения эта методика обеспечивает новую платформу для использования зачатых in vivo человеческих эмбрионов в качестве конечного эталона для будущих и текущих методов ВРТ.
Оригинал статьи
Выяснить, возможно ли после контролируемой стимуляции яичников (COS) и внутриматочной инсеминации (IUI) получить путем промывания матки зачатые in vivo и созревшие человеческие бластоцисты для проведения преимплантационного генетического тестирования на анеуплоидию (PGT-A) и сравнить их морфологические показатели по результатам PGT-A и шкале Гарднера с парными бластоцистами из контрольных циклов ЭКО.
Краткое резюме
В последовательной серии из 134 циклов COS с использованием стимуляции гонадотропинами и последующей IUI промывание матки позволило получить 136 эмбрионов в 42% (56/134) циклов исследования с сопоставимыми показателями эуплоидии in vivo и in vitro, но лучшей морфологией у эмбрионов in vivo.
Что уже известно
Эмбрионы, развивавшиеся in vivo, изученные на животных моделях, обладают другими характеристиками по сравнению с эмбрионами аналогичных видов, полученными in vitro. Такие сравнительные исследования между человеческими эмбрионами in vivo и in vitro не проводились из-за отсутствия надежного метода получения человеческих эмбрионов.
Дизайн исследования
Мы провели одномоментное проспективное контролируемое исследование среди женщин (n = 81), чтобы оценить безопасность, эффективность и осуществимость нового катетера для промывания матки и устройства для извлечения жидкости. Все процедуры промывания проводились в частном учреждении с отделением ВРТ с августа 2017 года по июнь 2018 года. С целью мониторинга клинических исходов и отдаленных осложнений за пациентами наблюдали в течение 30 дней после промывания. У 20 пациенток был проведен один цикл ЭКО (контрольная группа) с тем же протоколом стимуляции яичников для сравнения бластоцист in vivo и in vitro.
Материалы и методы
Для COS женщин стимулировали гонадотропинами. Триггер овуляции был назначен, когда было по крайней мере два доминантных фолликула ≥18 мм, а затем осуществлялась IUI спермой. Промывание матки происходило через 4-6 дней после IUI. Подгруппа из 20 женщин прошла процедуру промывания с последующим циклом ЭКО (контрольная группа ЭКО). Извлеченные эмбрионы характеризовали морфологически, подвергали биопсии трофэктодермы (Тэ), витрифицировали и хранили в жидком азоте. Биопсии анализировались с использованием метода секвенирования следующего поколения (NGS). После промывания назначали инъекции антагониста ГнРГ, чтобы вызвать менструацию.
Результаты
Всего было проведено 134 цикла промывания у 81 женщины. При промывании матки было извлечено 136 эмбрионов за 56 (42%) циклов. На момент криоконсервации было 40 (30%) дробящихся эмбрионов и 96 (70%) бластоцист. Бластоцисты были хорошего качества, причем 74% (70/95) были класса 3BB или выше по классификации Гарднера. Вымытые из матки бластоцисты имели достоверно более высокие морфологические показатели, чем контрольные эмбрионы из группы ЭКО, определяемые методом анализа Хи-квадрат (Р < 0,05). Это первое исследование по вымыванию полученных in vivo человеческих бластоцист после стимуляции яичников для генетической характеристики эмбриона. Восстановленные бластоцисты имели показатели хромосомной эуплоидии, аналогичные показателям, обнаруженным у контрольных эмбрионов из группы ЭКО. В 11 циклах (8,2%) определяемые уровни ХГЧ присутствовали через 13 дней после IUI, которые регрессировали спонтанно в двух случаях и снижались после кюретажа эндометрия в двух случаях. Прогрессирующие уровни ХГЧ были прерваны приемом метотрексата в трех случаях, а четыре пациента получили как кюретаж, так и метотрексат.
Ограничения
Первая цель состояла в том, чтобы оценить целесообразность промывания матки после стимуляции яичников для извлечения бластоцист на анализ, и эта цель была достигнута. Однако система промывания матки не была полностью оптимизирована в предыдущем опыте до уровней, которые были достигнуты в конце клинического исследования и могут быть применимы в клинической практике. Частота хромосомных аномалий у контрольных эмбрионов in vivo и ЭКО была сходной, но это было небольшое исследование. Однако по сравнению с большими историческими наборами данных эмбрионов in vitro генетические результаты in vivo находятся в пределах диапазона высококачественных эмбрионов in vitro.
Последствия интерпретации результатов
Промывание матки предлагает нехирургическую, малоинвазивную тактику для получения эмбрионов фертильных женщин, которые не хотят или не нуждаются в ЭКО, но заинтересованы в проведении ПГТ, сохранении фертильности путем криоконсервации эмбрионов или взаимном ЭКО (в случае лесбийских пар). С научной и потенциальной клинической точки зрения эта методика обеспечивает новую платформу для использования зачатых in vivo человеческих эмбрионов в качестве конечного эталона для будущих и текущих методов ВРТ.
Оригинал статьи